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英諾思EasyIso™人naïve CD4 T細(xì)胞分離試劑盒(SN3104):20分鐘解鎖96.8%高純度細(xì)胞分選

更新時(shí)間:2025-05-26點(diǎn)擊次數(shù):72
  英諾思EasyIso™人naïve CD4 T細(xì)胞分離試劑盒(SN3104):20分鐘解鎖96.8%高純度細(xì)胞分選
  在免疫學(xué)研究和細(xì)胞治療領(lǐng)域,精準(zhǔn)獲取高純度naïve CD4 T細(xì)胞是攻克自身免疫疾病、優(yōu)化CAR-T療法的關(guān)鍵。英諾思EasyIso™人naïve CD4 T細(xì)胞分離試劑盒(貨號(hào)SN3104)憑借無(wú)柱磁極分選技術(shù)和陰性篩選策略,實(shí)現(xiàn)從PBMC中快速分離目標(biāo)細(xì)胞,為科研與臨床提供高效解決方案。
  一、技術(shù)原理:陰性分選保障細(xì)胞活性
  本試劑盒采用生物素-鏈霉親和素磁珠偶聯(lián)系統(tǒng),通過(guò)三步精準(zhǔn)標(biāo)記實(shí)現(xiàn)高效分離:
  1.靶向標(biāo)記非目標(biāo)細(xì)胞:生物素偶聯(lián)抗體特異性結(jié)合CD8?T細(xì)胞、B細(xì)胞、單核細(xì)胞等非naïve CD4 T細(xì)胞表面標(biāo)志物
  2.磁珠高效捕獲:鏈霉親和素納米磁珠(40 nm粒徑)與標(biāo)記細(xì)胞結(jié)合,形成磁性復(fù)合物
  3.無(wú)柱磁極快速分離:通過(guò)磁力架吸附非目標(biāo)細(xì)胞,未標(biāo)記的CD45RA?CD45RO?naïve CD4 T細(xì)胞直接富集于上清液
  技術(shù)優(yōu)勢(shì):
  ?避免抗體與目標(biāo)細(xì)胞接觸,維持天然細(xì)胞狀態(tài)
  ?納米磁珠減少機(jī)械損傷,細(xì)胞活性**>95%**
  ?全程無(wú)需分選柱,降低樣本損失風(fēng)險(xiǎn)
  二、標(biāo)準(zhǔn)化操作流程(18-20分鐘完成)
  1.PBMC預(yù)處理
  采用密度梯度離心法獲取PBMC,調(diào)整濃度至1×10?cells/mL,70μm濾網(wǎng)過(guò)濾去除團(tuán)塊
  2.抗體孵育(10分鐘)
  按100μL/mL比例加入分離雞尾酒,常溫孵育10分鐘,標(biāo)記非目標(biāo)細(xì)胞
  3.磁珠偶聯(lián)(5分鐘)
  震蕩激活鏈霉親和素納米磁珠30秒,以100μL/mL加入樣本,輕柔混勻后靜置
  4.體積擴(kuò)展與磁分選
  1.流式管體系:補(bǔ)加FACS Buffer至2.5 mL
  2.離心管體系:補(bǔ)加至7.5 mL
  垂直置于磁力架吸附(單孔3分鐘/聯(lián)排5分鐘),傾倒上清即獲目標(biāo)細(xì)胞
  三、性能驗(yàn)證與核心數(shù)據(jù)
  經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)驗(yàn)證(圖B):
  ?分選前:PBMC中CD4?T細(xì)胞占比31%,其中naïve亞群僅43%
  ?分選后:
  ?CD4?T細(xì)胞純度97.1%
  ?CD45RA?CD45RO?naïve亞群純度96.8%
  ?細(xì)胞得率≥85%(與樣本質(zhì)量相關(guān))
  關(guān)鍵質(zhì)控提示:
  •使用含2%FBS的專用FACS Buffer,避免滲透壓波動(dòng)
  •嚴(yán)格無(wú)菌操作,確保細(xì)胞培養(yǎng)兼容性
  •建議搭配聯(lián)排磁力架處理多樣本
  四、三大應(yīng)用場(chǎng)景推薦
  1.免疫機(jī)制研究:分離后的naïve CD4 T細(xì)胞可直接用于:
 ?。?)TCR信號(hào)通路分析
 ?。?)Th細(xì)胞分化動(dòng)態(tài)追蹤
  (3)單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測(cè)序建庫(kù)
  2.細(xì)胞治療開發(fā):
  (1)CAR-T療法中naïve T細(xì)胞的優(yōu)先選用
 ?。?)腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(TIL)擴(kuò)增前分選
  3.疾病模型構(gòu)建:
 ?。?)自身免疫疾病過(guò)繼轉(zhuǎn)移模型
  (2)HIV潛伏感染機(jī)制研究
  為何選擇SN3104?
  •時(shí)間成本銳減:比流式分選快6倍,較傳統(tǒng)磁珠分選省30%操作步驟
  •成本效益突出:?jiǎn)未翁幚砹窟_(dá)1×10?細(xì)胞(SN3104L規(guī)格),適合大規(guī)模實(shí)驗(yàn)
  •數(shù)據(jù)可重復(fù)性高:經(jīng)多中心驗(yàn)證,批間差<5%
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